Påverkan av h63d-mutationer, magnetisk resonans och metaboliskt syndrom bland polikliniska hänvisningar för förhöjt serumferritin i Baskien | Annals of Hepatology

introduktion

SF-värden begärs ofta av kliniker.1 höjda nivåer av SF är ett vanligt resultat i rutinmässiga laboratorietester. Sådana patienter hänvisas till ett polikliniskt sjukhus samråd för testning för HF och genetisk hemokromatos.1-5 upphöjda SF-nivåer kan vara närvarande i olika olika kliniska tillstånd, såsom inflammatoriska sjukdomar, och specifikt i njur -, lever-och neoplastiska sjukdomar. Hos patienter med leversjukdom är förhöjt serumferritin karakteristiskt för ärftlig hemokromatos, men kan också hittas hos patienter med kronisk hepatit C, alkoholisk eller alkoholfri steatohepatit och alkoholfri fettlever.3,6

epidemiologiska studier på ärftlig hemokromatos (HH) i medelhavspopulationer har visat att förekomsten av C282Y är lägre än i nordeuropeiska länder,3,7 och att h63d-mutationen finns bland 15-20% av den allmänna befolkningen.3,8 i Baskien är allelfrekvensen så hög som 30%.7

det finns begränsade data i litteraturen om kliniska och fenotypiska egenskaper hos polikliniska patienter som hänvisas till HF.1 specifikt har det gjorts mycket lite forskning om epidemiologiska faktorer inklusive alkohol, viral hepatit, fetma och metaboliskt syndrom.

för att avgöra om (eller inte) en individ har överbelastning av leverjärn finns det ett mycket användbart radiologiskt verktyg, nämligen mätning av LIC med Mr.9,10 vid validering, med värden som är starkt korrelerade med de som bestäms biokemiskt och standardiserade, är LIC-värden erhållna med Mr lika användbara som de som erhålls genom leverbiopsi.9-11

målen för vår studie var att prospektivt analysera på varandra följande patienter som hänvisades till polikliniken på ett sekundärt sjukhus i Baskien och att bestämma orsakerna till HF samt relevansen av HFE-genmutationer och leverjärnmätning med MR i diagnosen.

Material och Metodpatienter

detta var en prospektiv studie med patienter från januari till December 2010. Studien genomfördes på Mendaro Hospital, Deba Valley, ett sekundärt sjukhus i den baskiska hälsovården (Osakidetza), med ett totalt avrinningsområde på 70 000 personer.

inklusionskriterier: på varandra följande öppenvårdspatienter hänvisade till HF (> 200 kg/L hos kvinnor, > 300 Kg/L hos män), i enlighet med WHO-kriterierna,1,3 av deras Allmänläkare var berättigade att delta i studien förutsatt att de var 18 år eller äldre.

Exklusionskriterier: systemisk inflammation, infektioner och njur-eller neoplastiska sjukdomar (uteslutna med kliniska, laboratorie-och radiologiska metoder).

Metoder

  • Radiologi.

    • a)

      Mr. MR-bilder erhölls med en 1.5-Tesla-system (Philips Intera, Osatek, Donostia). Den använda MR-tekniken (SIR-metoden) var den som föreslogs av Alustiza, et al.10 Eftersom steatos är frekvent utför vi systematiskt T1-viktad i fas och motsatt fasavbildning för att kassera leverstatos. Alla järnkvantifieringssekvenser var ifassekvenser för att vara säker på att fettet inte störde i signalintensitetsmätningar.12 LIC beräknad med denna modell har en hög korrelation med biokemiska mätningar, erhållna genom atomspektrometri, i leverbiopsiprover (r = 0,937).10 LIC betraktades som: normal (

mol / g), järnöverbelastning (IO) (37-80 kcal/g) och hög järnöverbelastning (HIO) (> 80 /miol/g).10 Vi har också studerat närvaron av leverfett. Steatos klassificerades som frånvarande eller närvarande.

  • b)

    ultraljud i buken. Steatos graderades av ultraljud och klassificerades som frånvarande eller närvarande.3

  • laboratoriemätningar. SF, Fe och TSI erhölls från blodprover som tagits fasta från alla patienter som ingår. Alla befanns ha höjt SF-värden (> 300 Baccarat/L), laboratoriets normala intervall för SF är 15 till 200 Baccarat/L hos kvinnor och 30 till 300 Baccarat/l hos män.1,3 de intervall som bedömdes vara normala för Fe och TSD var 50-145 kcal/dL respektive 15-45%.

    serumvärdena för ALT, AST, GGTP, alkaliskt fosfatas, bilirrubin, albumin, glukos, kolesterol, HDL-kolesterol, triglycerider etc., erhölls från samma blodprover.

  • HFE-mutationsanalys. DNA extraherades från blodproverna och HFE-genanalys utfördes med multiplex realtids-PCR med användning av LightCycler-teknik (LC 1.0). Samtidig detektion av HFE C282Y -, H63D-och S65C-mutationerna utfördes i en enda kapillär med användning av LC-Red 640, LC-Red 705 och fluorescein-märkta hybridiseringsprober (Tibmolbiol, Berlin, Tyskland). Smältkurvanalys användes för att skilja vildtyp och mutanta alleler i varje fall.

    resultaten jämfördes med en kontrollgrupp av blodgivare från samma geografiska område, Guipuzcoa.7

  • definition av metaboliskt syndrom (MS). Vi använde etablerade kriterier, 13 nämligen.

    • °

      Midjemått 94 cm i män; 80 cm i kvinnor, och två av följande faktorer.

    • °

      triglycerider 150 mg/dL eller behandling för denna dyslipidemi.

    • °

      HDL

    • °

      glukos 100 mg/dL eller typ 2-diabetes.

    • °

      hypertoni: systoliskt tryck 130 mmHg; diastoliskt tryck 85 mmHg, eller behandling för arteriell hypertoni.

    • °

      övervikt eller fetma, där ett kroppsmassindex (BMI) 25 och 30, fetma.6

  • informationen om typ 2-diabetes och behandling för högt blodtryck eller dyslipidemi samlades in från intervjun med patienten.

    • alkoholkonsumtion. Tung dricks definierades som konsumtionen av > 60 g/dag;8,14 medan > 40 g/dag ansågs måttlig alkoholkonsumtion. Informationen samlades in från intervjun med patienten.

    • statistik. SPSS 15.0 programvara (SSPS Inc., Chicago, IL, USA) användes för att utföra lämpliga statistiska analyser. Medelvärden med intervall och standardavvikelse beräknades för kontinuerliga variabler och frekvenser och procentsatser för kategoriska variabler.

      för att jämföra HFE-mutationsfrekvens hos patienter med HF och kontrollgruppen använde vi Chisquare och Fishers exakta tester på grund av det lilla antalet fall. I all analys, a p

    • etik. Studien genomfördes i enlighet med Helsingforsdeklarationen och med patienternas förståelse och samtycke. Studien godkändes av Mendaro Hospital Ethics Committee.

    Resultatpatienter

    totalt 132 patienter som uppfyllde urvalskriterierna inkluderades i studien. Det fanns en manlig övervägande på cirka 4: 1 (108 män, 24 kvinnor).

    inte alla resultat var tillgängliga för alla patienter.

    radiologi

    ultraljud i buken tyder på steatos i 69/132 (52,3%) och normalt i 44 (33,3%), med andra fynd i de återstående fallen (14,4%).

    LIC erhölls genom MR hos 79/132 patienter. Medelvärdet för LIC var 36,04 kcal / g (SD: 32.78, 5-210), 53 patienter som har normala koncentrationer (2061

    mol/ g), 22 IO (37-80 kg/g) och 4 HIO (> 80 kg/g), 50% med en predisponerande genotyp. Det vill säga 33% av patienterna hade IO och 5% HIO.

    steatos av Mr studerades hos 79/132 patienter: steatos var närvarande hos 27 patienter (34, 17%) och 52 patienter har inte leversteatos (65, 82%).

    kliniska och laboratoriedata

    de viktigaste kliniska och laboratoriedata presenteras i tabellerna 1-3. Sammantaget klassificerades 43/89 patienter (48,31%) som överviktiga (BMI 25-229.9), 36/89 (40.44%) som feta (BMI 20), och 10/89 (11.23%) som vanligt (

    Tabell 1.

    kliniska baslinjedata, laboratoriedata och resultat av leverjärnkoncentration (LIC) erhållna genom magnetisk resonansavbildning (MRI) hos patienterna som ingår i studien.

    medelvärde SD intervall
    ålder (år) (n:132) 54.42 13.47 23 – 83
    Vikt (kg) (n:89) 83.17 15.86 43 – 137
    Höjd (cm) (n:89) 175.28 55.21 146 – 191
    BMI (kg / m2) (n:89) 28.80 3.96 17 – 39
    alkohol (g / dag) (n:121) 20.83 33.95 0 – 140
    Ferritin (ng/mL) (n:132) 579.54 296.57 206 – 1668
    transferrinmättnad ( % ) (n:132) 43.87 14.10 12 – 95
    Fe (kg/dL) (n:132) 133.77 49.69 55 – 322
    alat (IE / L) (n:132) 55.61 47.22 12 – 371
    GOT (IU / L) (n:132) 41.01 35.33 4 – 230
    GGTP (IE / L) (n:132) 94.83 141.47 8 – 806
    alkaliskt fosfatas (IE / L) (n:132) 73.32 20.71 34 – 160
    Bilirubin (mg / dL) (n:132) 0.74 0.38 0.15 – 2.71
    Albumin (g / L) (n:132) 4.60 0.32 3.50 – 5.50
    LIC med MRI (CB/g) (n:79) 36.04 32.79 5 – 210

    n: antal patienter för varje variabel.

    Tabell 2.

    laboratoriedata och kliniska data för metaboliskt syndrom.

    N: 97 medelvärde SD intervall
    glukos (mg / dL) 106.95 25.03 73 – 272
    kolesterol (mg / dL) 201.71 42.92 96 – 338
    HDL-LAP (mg / dL) 54.00 17.08 28 – 162
    triglycerider (mg/dL) 151.75 93.71 40 – 477
    systoliskt blodtryck (mmHg) 139.26 19.93 100 – 190
    diastoliskt blodtryck (mmHg) 81.19 11.03 50 – 105
    Midjemått (cm) 100.06 11.70 63 – 132

    tabell 3.

    HFE-genmutationer hos Baskiska patienter från studiegruppen och kontrollgruppen.7

    N:120 Study group Control group
    C282Y/C282Y 0 0
    C282Y/WT 6 8
    C282Y/H63D 6 4
    H63D/H63D 21 9
    H63D/WT 38 45
    WT/WT 47 43
    S65C/WT 2 5
    H63D/S65C 0 2

    andelen överviktiga patienter var hög, och vi studerade Mr-resultaten i denna grupp: 16 av 36 överviktiga patienter studerades av MR för järn och steatos. Medelvärdet för LIC för gruppen var 34,68 occurmol / g (SD 27,72). Steatos var närvarande hos 8 av 16 studerade patienter. Tre patienter från 8 utan steatos hade en ultraljud som föreslog steatos, men det fanns inga diskordansfall (ultraljud/ MR) i steatosgruppen.

    alkoholdata (121 patienter) avslöjade att 77 (63.6%) konsumerade ingen och 22 konsumerade 60 g 60 g alkohol/dag (18,1%). Applicera en cut-off på > 40 g/dag, 25,6% betraktades som drinkare. Den genomsnittliga konsumtionen var 20,83 g alkohol/dag (SD: 33,95, 0-140).

    Viral serologi gav positiva resultat hos 6/132 patienter (4,5%): för HBV i 2 fall (1,5%) och HB-sAg och HCV hos 4 (3%).

    totalt fick 50 patienter behandling för hypertoni och 35 för dyslipidemi.

    MS (13) detekterades hos 44/80 män (55%) och 10/ 17 kvinnor (59%), vilket totalt motsvarar 54/97 av HF-patienterna (55, 67%).

    inga leverbiopsier togs under studieperioden.

    HFE-mutationsanalys

    denna analys utfördes på 120 patienter. Mutationer hittades i 60,84% av fallen i studiegruppen (jämfört med 62,93% av kontrollgruppen). Resultaten presenteras i tabell 3. Genotypfrekvensen för h63d / H63D-mutationen i fall var mer än dubbelt så stor som i kontroller (17,5 mot 7,76%), medan allelfrekvensen för h63d-mutationen också var högre: 36 mot 31% kontroller.7 dessa skillnader var signifikanta (p

    predisponerande genotyper för leverjärnöverbelastning/ HH8 hittades hos 27/120 patienter (22, 5%), H63D/ H63D i 21 och C282Y/H63D i 6 fall. Tjugo patienter hade TS > 45%, och LIC mättes med MR i alla utom ett fall: i h63d/H63D-gruppen hade 7 patienter höjt och 8 normala LIC-värden, medan i C282Y/H63D-gruppen befanns en patient ha höjt och 3 normala Lic med Mr.

    HFE-mutationsanalys i MS

    denna analys studerades hos 51 Från 54 patienter med MS.resultaten var: 2 C282Y/wt (3, 92%), 11 H63D/H63D (21.56%), 15 H63D/wt (29,41%), 3 C282Y/H63D (5,88), 19 wt/wt (37,25%) och 1 S65C (1,96%). Genotypfrekvensen för h63d / H63D-mutationen i MS-fall var signifikant högre än i kontroller7 -21,56 vs. 7,76%− (p = 0,011); H63D-allelfrekvensen var 42,15% i MS-gruppen och 31% i kontroller (p = 0,027).

    HFE och leverjärnöverbelastning

    tjugosex patienter visade sig ha Io-HIO i levern genom MR. Bland dessa individer fann HFE-mutationsanalysen: H63D / H63D i 8 Fall; wt/ wt, 7; H63D/ wt, 7; S65C/ wt, 2; C282Y/ wt, 1; och C282Y / H63D, 1; det vill säga 9 av dessa 26 patienter hade predisponerande genotyper.

    när vi analyserade några speciella grupper, nämligen SF > 1,000 ng/L-gruppen och HIO-gruppen fick vi följande resultat:

    • SF > 1000 ng/l-grupp: 12/132 patienter (9%) hade SF-nivåer på > 1000 ng/L. i denna grupp bestämdes genotyperna hos 11 patienter med följande resultat: H63D/wt i 5; wt/wt, 3; H63D/ H63D, 1; C282Y/ wt, 1; och S65C/wt, 1. Följaktligen verkar det som om det inte finns något samband mellan HFE-genmutationer och SF > 1000 ng/L. Vidare erhölls LIC genom MR hos 10/12 av patienterna i gruppen med hög ferritin (> 1000 ng/L). LIC höjdes (> 36 GHz/G), motsvarande IO, hos 8/10 (80%) av dessa patienter, medan 2 hade HIO.

    • HIO-grupp: totalt sett hade fyra patienter Lic: er på > 80 kcal/g, och deras genetiska fynd var: H63D/wt i 2; C282Y/H63D i 1; och H63D/ H63D i 1; det vill säga 50% av dessa patienter hade predisponerande genotyper. C282Y / H63D-patienten konsumerade ingen alkohol och hade varken steatos eller MS. En h63d-patient drack mer än 80 g alkohol/dag och presenterade steatos; medan den andra patienten med H63D drack ingen alkohol och steatos observerades inte. Slutligen drack h63d/H63D-patienten mer än 80 g / dag men hade inte steatos.

    diskussion

    HF är ett vanligt fynd i primärvården vid rutinmässiga laboratoriestudier. Patienter med förhöjd SF hänvisas till gastroenterologi-hepatologi enheter för att studera relevansen av denna kliniska enhet.1-5, 15, 16 nyligen har Adams och Barton17 publicerat en artikel om att inte mer än 10% av dessa HF-patienter har leverjärnöverbelastning. I en retrospektiv studie, Yenson, et al.5rapporterade en ännu lägre hastighet på 5% av lever IO i kinesiska och andra asiatiska populationer i British Columbia, Kanada. Flera studier har fokuserat på att analysera orsakerna till hög eller mycket hög HF,18-21 men väldigt få har undersökt etiologin hos patienter som hänvisas till HF.1-3,5,16

    Wong och Adams, 1 i en retrospektiv serie av 119 patienter, fann att I icke-C282Y homozygoter med SF > 1000 ng/L var IO frånvarande hos 64% av patienterna. Analys av denna situation hos patienterna som ingår i vår studie visade sig 80% av de med en upphöjd SF > 1000 ng/L (12 patienter) ha IO. Dever, et al.2granskade de kliniska diagrammen för patienter med HF som hänvisades till en io-klinik i USA: 51% av patienterna diagnostiserades med HH. Resultaten av den studien påverkas emellertid av de blandade egenskaperna hos ämnen som ingår (inte bara de som hänvisas till HF, men också några med kända HH och deras släktingar) och är därför inte användbara för jämförelse med våra data. I Italien, Licata, et al.3 studerade närvaron av leversideros i leverbiopsier hos 54 patienter och fann den i 17 (32%) av fallen. Perez Aguilar, et al.15 i Valencia, Spanien, studerade närvaron av järn i leverbiopsier av 14 patienter med SF > 1000 ng/L, men för denna serie rapporterades inga kvantitativa mätningar. I vår studiegrupp befanns så många som 33% av patienterna ha leverjärnöverbelastning med en validerad metod med Mr.9-11 och ännu viktigare, totalt 5% av patienterna visade hög leverjärnöverbelastning (> 80 occurmo1/g), som HH-patienter.

    Wong, et al.1 rapporterade att 71% av patienterna med förhöjd LIC hade en TSI > 50%. I vår serie hade > 50% patienter höjt TSI i IO-HIO-gruppen.

    i Baskien skiljer sig förekomsten av HFE-genmutationer i HH och den allmänna befolkningen från andra populationer i Europa och på andra håll i världen.7 i HH-gruppen hade endast 57% av patienterna C282Y/C282Y-mutationen, medan h63d-mutationen är mycket vanlig även i den allmänna befolkningen, med en frekvens > 30%.

    det finns bevis för att H63D-mutationen bidrar till järnöverbelastning, ökar serumjärn och transferrin, och också att dess förhållande till HH är oberoende av närvaron av C282Y-mutationen.8,21 i en kontrollgrupp var 7 h63d-allelfrekvensen 31%. I denna studie av patienter som hänvisades till HF presenterade 61% mutationer i HFE-genen, liknande frekvensen i kontroller (63%). Allelfrekvensen var 36 mot 31% i kontrollgruppen och genotypfrekvensen för h63d/H63D-mutationen var 17,5% jämfört med endast 7,75% i kontrollgruppen (båda p 22,23

    i en tidigare studie av Aguilar-Martinez, et al., 23 frekvensen av h63d homozygot genotyp befanns vara högre bland patienter som hade hänvisats till en personlig eller familjehistoria av IO än i den allmänna befolkningen. Den orsakande rollen för h63d / H63D-mutationen i HH eller IO har visats,22-24 men med mindre penetrans och en avsevärd variation i fenotypiskt uttryck.23 bedömning av relevansen av HFE-mutationer i våra HIO-och IO-grupper uppstod inga signifikanta skillnader. Vidare sågs inga HFE-genotypskillnader när man studerade SF > 1000 ng/L-gruppen.

    kliniska studier tyder på att det finns skillnader i järnmetabolism och leversjukdomar mellan män och kvinnor.25 i överensstämmelse med detta var det i vår serie ett könsförhållande mellan män och kvinnor bland patienter på 4:1. Virala orsaker (4.5%) visade sig inte vara signifikant som den faktor som ligger till grund för HF i vår grupp, till skillnad från i andra populationer, såsom asiater, hos vilka viral hepatit är vanligare (17%) hos HF-patienter.5 i andra studier har den virala prevalensen av hepatit C-viruset varierat från 3 till 42, 7%.1-3

    patienter med en historia av kronisk alkoholkonsumtion eller funktioner i MS ofta närvarande med Hyperferritinemi.6 tungt drickande (> 60 g/dag alkohol) detekterades som en orsak,8,13 hos 18% av den studerade befolkningen (25, 6% om man överväger en cut-off på > 40 g/dag). Övervikt (BMI: 25-29.9) och fetma (BMI > 30) framträder emellertid som de viktigaste orsakerna till denna enhet: 89% av patienterna var överviktiga eller feta vid tidpunkten för HF-diagnos. De överviktiga patienterna presenterade en LIC med Mr på 34,68 occurmol / g, inte annorlunda än för hela studiegruppen, och 50% avslöjade fett i sina lever, steatos. Vidare avslöjade lever ultraljud tecken på steatos, med misstanke om alkoholfri fettleversjukdom, hos 52% av patienterna. När vi studerade för närvaro av fett i levern genom MR, var steatos närvarande hos 34,17% av de 79 studerade patienterna. MS är närvarande hos 25% av vuxna i västländer, och HF finns hos endast 15% av MS-patienterna.26-30 i en nyligen genomförd studie för detektion av HH och biokemisk järnöverbelastning i primärvården, utvecklad i Spanien, hade 45% av patienterna med förhöjda JärnMått (TSI och/eller SF) MS.31 i vår studie uppfyllde 56% av patienterna med HF kriterierna för MS. med tanke på den höga andelen h63d-mutation i befolkningen har vi studerat HFE-mutationer i MS-gruppen för att avgöra om dessa mutationer predisponerar för MS. h63d/H63D-mutationen i MS-fall var signifikant högre än i kontroller7 -21.56 vs. 7.76%− (p = 0.011) och H63D-allelfrekvensen var 42.15% i MS-gruppen och 31% i kontroller (p = 0.027). Dessa resultat påpekar att h63d / h63d-genotyp och H63D-allel predisponerar patienterna med HF För att utveckla en MS.

    analysera den höga SF-gruppen fann vi inget samband mellan HFE-genmutationer och SF > 1000 ng/L. av 12 patienter med hög SF bestämdes LIC av MR i 10. LIC höjdes hos 8 av dessa 10 patienter (80%), vilket indikerar att de hade Io.

    slutsats

    Sammanfattningsvis kan vi säga från denna studie att h63d/H63D-genotypen predisponerar för HF. Fetma och övervikt är mycket viktiga etiologiska faktorer som påverkar 89% av våra HF-patienter. I vår region kan alkohol vara en orsak till HF men virus var sällsynta som en underliggande faktor. Inte alla HF representerar järnöverbelastning6 men MR avslöjade järnöverbelastning hos 33% av patienterna. MS förekommer hos 56% av patienterna och kan induceras av h63d/H63D-genotyp och H63D-allel.

    förkortningar

    • BMI: kroppsmassindex.

    • Fe: järn.

    • HF: Hyperferritinemi.

    • HH: ärftlig hemokromatos.

    • HIO: hög järnöverbelastning.

    • Io: järnöverbelastning.

    • LIC: lever järn koncentration.

    • Mr: magnetisk resonansavbildning.

    • MS: metaboliskt syndrom.

    • SF: ferritin.

    • TSD: transferrinmättnad.

    intressekonflikt

    författarna rapporterar inga intressekonflikter. Författarna ansvarar för innehållet och skrivandet av papperet.

    författare ’ a bidrag

    alla författare uppfyllde kriterierna för författarskap som fastställts av International Committee of Medical Journal Editors. Manuskriptet representerar ärligt arbete och alla författare kan verifiera giltigheten av de rapporterade resultaten.

    kongressen: presenterad som abstrakt vid Liver International meeting (EASL) 2012; Barcelona, Spanien, April 18-22/ 2012.

    bekräftelse

    författarna tackar översättningsavdelningen för Instituto Vasco de Investigaciones Sanitarias (BIOEF) för deras hjälp.

    Lämna ett svar

    Din e-postadress kommer inte publiceras.