Dopad H63D mutace, magnetické rezonance a metabolického syndromu mezi ambulantní doporučení pro zvýšenou sérovou hladinou feritinu v Baskicku | Annals of Hepatology

Úvod

SF hodnoty jsou často požaduje lékařů.1 zvýšené hladiny SF jsou běžným zjištěním v rutinních laboratorních testech. Tito pacienti jsou odkázáni na ambulantní konzultaci nemocnice pro testování na HF a genetickou hemochromatózu.1-5 zvýšené hladiny SF mohou být přítomny v různých klinických stavech, jako jsou zánětlivá onemocnění, a konkrétně u renálních, jaterních a neoplastických onemocnění. U pacientů s onemocněním jater, zvýšené sérové hladiny feritinu je charakteristické pro dědičnou hemochromatózu, ale mohou být také nalezeny u pacientů s chronickou hepatitidou C, alkoholické nebo nealkoholické steatohepatitis, a nealko mastné onemocnění jater.3,6

Epidemiologické studie na dědičné hemochromatóza (HH) ve Středomořské populace ukázaly, že prevalence C282Y je nižší než v zemích Severní evropy,3,7 a H63D mutace se vyskytuje mezi 15-20% z celkové populace.3,8 v Baskicku je frekvence alely až 30%.7

v literatuře jsou omezené údaje o klinických a fenotypových charakteristikách ambulantních pacientů uvedených pro HF.1 konkrétně došlo k velmi malému výzkumu epidemiologických faktorů včetně alkoholu, virové hepatitidy, obezity a metabolického syndromu.

v současné době existuje velmi užitečný radiologický nástroj, jmenovitě měření LIC pomocí MRI, k určení, zda má (nebo ne) jedinec přetížení jater železem.9,10 při validaci s hodnotami silně korelovanými s hodnotami stanovenými biochemicky a standardizovanými jsou hodnoty LIC získané MRI stejně užitečné jako hodnoty získané jaterní biopsií.9-11

cíle naší studie bylo prospektivně analyzovat po sobě jdoucích pacientů odkazoval se na ambulantní klinice sekundární nemocnice v Baskicku a určit příčiny HF, stejně jako význam HFE mutací a železa v játrech měření pomocí MRI v diagnostice.

materiál a Metodypacienti

jednalo se o prospektivní studii zahrnující pacienty od ledna do prosince 2010. Studie byla provedena v nemocnici Mendaro v údolí Deba, sekundární nemocnici v baskickém zdravotnictví (Osakidetza), s celkovým povodím 70 000 lidí.

splňují kritéria pro Zařazení: konsekutivní pacienti uvedené pro HF (> 200 µg/L u žen, > 300 µg/L u mužů), v souladu s kritérii WHO,1,3 u svých praktických lékařů byly způsobilé k účasti ve studii, za předpokladu, že jsou ve věku 18 let nebo starší.

kritéria vyloučení: systémový zánět, infekce a renální nebo neoplastická onemocnění (vyloučeno klinickými, laboratorními a radiologickými metodami).

Metody

  • Radiologie.

    • a)

      MRI. Snímky MRI byly získány s 1.5-Systém Tesla (Philips Intera, Osatek, Donostia). Použitá technika MRI (metoda SIR) byla technika navržená Alustizou a kol.10 protože steatóza je častá, systematicky provádíme T1 vážené in-fázové a protifázové zobrazování, abychom zlikvidovali steatózu jater. Všechny kvantifikační sekvence železa byly v fázových sekvencích, aby se ujistil, že tuk nezasahuje do měření intenzity signálu.12 LIC vypočtená tímto modelem má vysokou korelaci s biochemickými měřeními získanými atomovou spektrometrií ve vzorcích jaterní biopsie (r = 0,937).10 Lic byl považován za: normální (µ

mol/g), železem (IO) (37-80 µmol/g) a vysoké přetížení železem (HIO) (> 80 /miol/g).10 Také jsme studovali přítomnost jaterního tuku. Steatóza byla klasifikována jako nepřítomná nebo přítomná.

  • b)

    břišní ultrazvuk. Steatóza byla klasifikována ultrazvukem a klasifikována jako nepřítomná nebo přítomná.3

  • laboratorní měření. SF, Fe a TSI byly získány ze vzorků krve odebraných nalačno od všech zahrnutých pacientů. Bylo zjištěno, že všechny zvýšily hodnoty SF (> 300 µg / L), laboratorní normální rozmezí pro SF je 15 až 200 µg/L u žen a 30 až 300 µg/L u mužů.1,3 rozmezí považovaná za normální pro Fe a TSI byla 50-145 µg / dL a 15-45%.

    sérové hodnoty ALT, AST, GGTP, alkalické fosfatázy, bilirrubinu, albuminu, glukózy, cholesterolu, HDL-cholesterolu, triglyceridů atd., byly získány ze stejných vzorků krve.

  • analýza mutací HFE. DNA byla extrahována ze vzorků krve a analýza genu HFE byla provedena multiplexní PCR v reálném čase pomocí technologie LightCycler (LC 1.0). Simultánní detekce HFE C282Y, H63D a S65C mutací byla provedena v jediném kapilární pomocí LC-Red 640, LC-Červená 705 a fluoresceinem značených hybridizačních sond (Tibmolbiol, Berlín, Německo). Analýza tavící křivky byla použita k rozlišení divokých a mutantních alel v každém případě.

    výsledky byly porovnány s kontrolní skupinou dárců krve ze stejné zeměpisné oblasti, Guipuzcoa.7

  • definice metabolického syndromu (MS). Použili jsme stanovená kritéria, konkrétně 13.

    • °

      obvod Pasu ≥ 94 cm u mužů, ≥ 80 cm u žen, a dva z následujících faktorů.

    • °

      triglyceridy ≥ 150 mg / dL nebo léčba této dyslipidemie.

    • °

      HDL

    • °

      glukóza ≥ 100 mg / dL nebo diabetes 2.typu.

    • °

      Hypertenze: systolický tlak ≥ 130 mmHg; diastolický tlak ≥ 85 mmHg nebo léčba arteriální hypertenze.

    • °

      nadváha nebo obezita, kde index tělesné hmotnosti (BMI) 25 a 30, obezita.6

  • informace o diabetu 2. typu a léčbě hypertenze nebo dyslipidemie byly získány z rozhovoru s pacientem.

    • konzumace alkoholu. Těžké pití bylo definováno jako spotřeba > 60 g / den; 8,14, zatímco > 40 g / den byla považována za mírnou konzumaci alkoholu. Informace byly shromážděny z rozhovoru s pacientem.

    • statistiky. SPSS 15.0 software (SSPS Inc., Chicago, IL, USA) byla použita k provedení příslušných statistických analýz. Průměrné hodnoty s rozsahem a směrodatnou odchylkou byly vypočteny pro spojité proměnné a frekvence a procenta pro kategorické proměnné.

      pro porovnání frekvence mutací HFE u pacientů s HF a kontrolní skupinou jsme použili přesné testy Chisquare a Fisher, vzhledem k malému počtu případů. Ve všech analýzách, p

    • etika. Studie byla provedena v souladu s Helsinskou deklarací as porozuměním a souhlasem pacientů. Studii schválila Etická komise Nemocnice Mendaro.

    Výsledkypacienti

    do studie bylo zahrnuto celkem 132 pacientů splňujících kritéria výběru. Převaha mužů byla přibližně 4:1 (108 mužů, 24 žen).

    ne všechny výsledky byly k dispozici pro všechny pacienty.

    Radiologie

    Břišní ultrazvuk byl sugestivní steatózy v 69/132 (52.3%), a normální 44 (33.3%), s jinými nálezy v ostatních případech (14.4%).

    LIC byla získána MRI u 79/132 pacientů. Průměrná hodnota LIC byla 36,04 µmol / g (SD: 32.78, 5-210), 53 pacientů s normální koncentrace (µ

    mol/ g), 22 IO (37-80 µmol/g), a 4 HIO (> 80 µmol/g), 50% s predispozicí genotypu. To znamená, že 33% pacientů mělo IO a 5% HIO.

    Steatóza pomocí MRI byl zkoumán v 79/132 pacientů: steatóza byla přítomna u 27 pacientů (34.17%) a 52 pacientů nebyly jaterní steatóza (65.82%).

    klinické a laboratorní údaje

    hlavní klinické a laboratorní údaje jsou uvedeny v tabulkách 1-3. Celkově 43/89 pacientů (48.31%) bylo klasifikováno jako nadváha (BMI 25-229.9), 36/89 (40.44%) jako obézní (BMI ≥ 30), a 10/89 (11.23%) jako obvykle (

    Tabulka 1.

    Klinické základní údaje, laboratorní údaje a koncentrací železa v játrech (LIC) výsledky získané pomocí magnetické rezonance (MRI) pacientů zahrnutých ve studii.

    SD Rozsah
    Věk (rok) (n:132) 54.42 13.47 23 – 83
    Hmotnost (kg) (n:89) 83.17 15.86 43 – 137
    Výška (cm) (n:89) 175.28 55.21 146 – 191
    BMI (kg/m2) (n:89) 28.80 3.96 17 – 39
    Alkohol (g/den) (n:121) 20.83 33.95 0 – 140
    Feritin (ng/mL) (n:132) 579.54 296.57 206 – 1668
    saturace Transferinu (%) (n:132) 43.87 14.10 12 – 95
    Fe (µg/dL) (n:132) 133.77 49.69 55 – 322
    ALT (IU/L) (n:132) 55.61 47.22 12 – 371
    (IU/L) (n:132) 41.01 35.33 4 – 230
    GGTP (IU/L) (n:132) 94.83 141.47 8 – 806
    Alkalická fosfatáza (IU/L) (n:132) 73.32 20.71 34 – 160
    Bilirubin (mg/dL) (n:132) 0.74 0.38 0.15 – 2.71
    Albumin (g/L) (n:132) 4.60 0.32 3.50 – 5.50
    LIC pomocí MRI (µmol/g) (n:79) 36.04 32.79 5 – 210

    n: počet pacientů, pro každou proměnnou.

    Tabulka 2.

    laboratorní údaje a klinické údaje pro metabolický syndrom.

    N:97 SD Rozsah
    Glukózy v krvi (mg/dL) 106.95 25.03 73 – 272
    Cholesterol (mg/dL) 201.71 42.92 96 – 338
    HDL-LAP (mg/dL) 54.00 17.08 28 – 162
    Triglyceridy (mg/dL) 151.75 93.71 40 – 477
    Systolický krevní tlak (mmHg) 139.26 19.93 100 – 190
    Diastolický krevní tlak (mmHg) 81.19 11.03 50 – 105
    obvod Pasu (cm) 100.06 11.70 63 – 132

    Tabulka 3.

    mutace genu HFE u baskických pacientů ze studijní skupiny a kontrolní skupiny.7

    N:120 Study group Control group
    C282Y/C282Y 0 0
    C282Y/WT 6 8
    C282Y/H63D 6 4
    H63D/H63D 21 9
    H63D/WT 38 45
    WT/WT 47 43
    S65C/WT 2 5
    H63D/S65C 0 2

    procento obézních pacientů byla vysoká, a studovali jsme MRI nálezy v této skupině: 16 z 36 obézních pacientů byly studovány pomocí MRI pro železo a steatóza. Průměrná hodnota LIC ve skupině byla 34,68 µmol / g (SD 27,72). Steatóza byla přítomna u 8 ze 16 studovaných pacientů. Tři pacienti z 8 bez steatózy měli ultrazvuk, který naznačoval steatózu, ale ve skupině se steatózou nebyly žádné případy neshody (ultrazvuk/ MRI).

    údaje o alkoholu (121 pacientů) odhalily, že 77 (63.6%) spotřebováno žádné a 22 spotřebováno ≥ 60 g alkoholu / den (18, 1%). Při použití mezní hodnoty > 40 g / den bylo 25,6% považováno za pijáky. Průměrná spotřeba byla 20,83 g alkoholu / den (SD: 33,95, 0-140).

    Virová sérologie pozitivní výsledky v 6/132 pacientů (4.5%): pro HBV ve 2 případech (1.5%) a HB-sAg a HCV ve 4 (3%).

    celkem 50 pacientů bylo léčeno pro hypertenzi a 35 pro dyslipidemii.

    MS (13) byla zjištěna u 44/80 mužů (55%) a 10/ 17 žen (59%), což celkově odpovídá 54/97 pacientů s HF (55,67%).

    během studovaného období nebyly odebrány žádné jaterní biopsie.

    analýza mutací HFE

    tato analýza byla provedena u 120 pacientů. Mutace byly nalezeny v 60,84% případů ve studované skupině (vs. 62,93% kontrolní skupiny). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 3. Genotyp četnost H63D/H63D mutace v případech, byl více než dvakrát vyšší než u kontrol (17.5 vs. 7.76%), zatímco alely H63D mutace byla také vyšší: 36 vs. 31% kontrol.7 Tyto rozdíly byly signifikantní (p

    genotypy Predisponující pro jater železem/ HH8 byly nalezeny v 27/120 pacientů (22.5%), H63D/ H63D v 21 a C282Y/H63D v 6 případech. Dvacet pacientů mělo TS > 45%, a LIC byla měřena pomocí MRI ve všech ale jednom případě: v H63D/H63D skupině 7 pacientů byl zvýšen a 8 normální LIC hodnoty, zatímco v C282Y/H63D skupiny, u jednoho pacienta byla zjištěna zvýšena a 3 normální země s nízkými příjmy pomocí MRI.

    HFE analýzy v MS

    Této analýzy byl zkoumán v 51 z 54 pacientů s MS. výsledky byly: 2 C282Y/wt (3.92%), 11 H63D/H63D (21.56%), 15 H63D/wt (29.41%), 3 C282Y/H63D (5.88), 19 wt/wt (37.25%), a 1 S65C (1.96%). Genotyp četnost H63D/H63D mutace v MS případech byla výrazně vyšší než v controls7 -21.56 vs. 7.76%− (p = 0.011); H63D allelickou frekvence byla 42,15% MS skupina a 31% u kontrol (p = 0.027).

    HFE a jater železem

    Dvacet šest pacientů bylo prokázáno, že mají IO-HIO v játrech pomocí MRI. Mezi těmito jedinci byla nalezena analýza mutace HFE: H63D / H63D v 8 případech; wt / wt, 7; H63D/wt, 7; S65C/wt, 2; C282Y / wt, 1; a C282Y / H63D, 1; to znamená, že 9 z těchto 26 pacientů mělo predispoziční genotypy.

    Když jsme se analyzovat některé speciální skupiny, a to SF > 1 000 ng/L group, a HIO skupiny získali jsme následující výsledky:

    • SF > 1000 ng/L skupina: 12/132 pacientů (9%) SF úrovně > 1 000 ng/L, V této skupině, genotypy byly stanoveny v 11 pacientů s následujícími výsledky: H63D/wt v 5; wt/wt, 3; H63D/ H63D, 1; C282Y/ wt, 1; a S65C/wt, 1. Zdá se tedy, že neexistuje žádný vztah mezi mutacemi genu HFE a SF > 1 000 ng / l. Dále byl LIC získán MRI u 10/12 pacientů ve skupině s vysokým feritinem (> 1 000 ng / L). LIC byla zvýšena (> 36 µmol / g), což odpovídá IO, u 8/10 (80%) těchto pacientů, zatímco 2 měli HIO.

    • skupina HIO: celkově měli čtyři pacienti Lic > 80 µmol/g a jejich genetické nálezy byly: H63D / wt u 2; C282Y / H63D u 1; a H63D / H63D u 1; to znamená, že 50% těchto pacientů mělo predisponující genotypy. Pacient C282y / H63D konzumoval žádný alkohol a neměl steatózu ani MS. Jeden H63D pacient vypije více než 80 g alkoholu/den a prezentovány steatóza; zatímco jiný pacient s H63D, pili alkohol a steatóza nebyla pozorována. Nakonec pacient H63D/ H63D opil více než 80 g / den, ale neměl steatózu.

    diskuse

    HF je častým nálezem v primární péči při provádění rutinních laboratorních studií. Pacienti s zvýšené SF jsou podle gastroenterologie-hepatologie jednotky studovat význam této klinické jednotky.1-5,15,16 Nedávno, Adams a Barton17 publikovali článek o tom, že ne více než 10% z těchto HF pacientů s poruchou funkce jater železem. V retrospektivní studii, Yenson, et al.5prohlásil ještě nižší míru 5% jaterních IO v čínské a jiné asijské populaci v Britské Kolumbii v Kanadě. Několik studií se zaměřilo na analýzu příčin vysokého nebo velmi vysokého HF, 18-21, ale jen velmi málo zkoumalo etiologii pacientů uvedených na HF.1-3,5,16

    Wong a Adams,1 v retrospektivní sérii 119 pacientů, zjistil, že v non-C282Y homozygotů s SF > 1 000 ng/L, IO byl přítomen u 64% pacientů. Analýze této situace u pacientů zahrnutých v naší studii, 80% z těch, se zvýšenou SF > 1 000 ng/L (12 pacientů) bylo zjištěno, že IO. Dever a kol.2prohlédl klinické grafy pacientů s HF odkazoval se na kliniku IO v USA: 51% subjektů bylo diagnostikováno s HH. Výsledky této studie jsou však ovlivněny smíšené charakteristiky subjektů (nejen ty uvedené pro HF, ale také některé známé HH a jejich příbuzných), a proto nejsou vhodné pro srovnání s našimi daty. V Itálii Licata a kol.3 studoval přítomnost jaterní siderózy v jaterních biopsiích 54 pacientů a zjistil ji v 17 (32%) případech. Perez Aguilar, et al.15 ve španělské Valencii studoval přítomnost železa v jaterních biopsiích u 14 pacientů se SF > 1 000 ng / L, ale pro tuto sérii nebyla hlášena žádná kvantitativní měření. V naší studijní skupině bylo zjištěno, že až 33% pacientů má přetížení jater železem validovanou metodou pomocí MRI.9-11 A co je důležitější, celkově 5% pacientů ukázaly vysokou jater železem (> 80 µmo1/g), jako HH pacientů.

    Wong, et al.1 uvádí, že 71% pacientů se zvýšenou LIC mělo TSI > 50%. V naší sérii > 50% pacientů zvýšilo TSI ve skupině IO-HIO.

    v Baskicku se prevalence genových mutací HFE v HH a obecné populaci liší od ostatních populací v Evropě a jinde po celém světě.7 ve skupině s HH mělo pouze 57% pacientů mutaci C282Y/C282Y, zatímco mutace H63D je velmi rozšířená i v běžné populaci s frekvencí > 30%.

    Existují důkazy, H63D mutace, které přispívají k přetížení železem, zvýšení sérového železa a transferinu, a také to, že její vztah s HH je nezávislý na přítomnosti mutace C282Y.8,21 v kontrolní skupině, 7 frekvence alely H63D byla 31%. V této studii pacientů uvedených na HF vykazovalo 61% mutace v genu HFE, podobné míře v kontrolách (63%). Alela frekvence byla 36 vs. 31% v kontrolní skupině, a genotyp četnost H63D/H63D mutace bylo 17,5%, ve srovnání s pouze 7.75% v kontrolní skupině (p 22,23

    V předchozí studii Aguilar-Martínez et al.,23 frekvence H63D homozygotní genotypu byla zjištěna vyšší mezi pacienty, kteří byli podle s osobní nebo rodinnou anamnézou IO než v obecné populaci. Byla prokázána příčinná role mutace H63D/H63D v HH nebo IO,22-24, ale s menší penetrací a značnou variací fenotypové exprese.23 při hodnocení relevance mutací HFE v našich skupinách HIO a IO nebyly zjištěny žádné významné rozdíly. Dále nebyly pozorovány žádné rozdíly v genotypu HFE při studiu skupiny SF > 1 000 ng / L.

    klinické studie naznačují, že existují rozdíly v metabolismu železa a onemocnění jater mezi muži a ženami.25 v souladu s tím byl v naší sérii poměr pohlaví mužů a žen mezi pacienty 4: 1. Virové příčiny (4.5%) nebylo zjištěno, že je významný jako faktor, který je základem HF v naší skupině, na rozdíl od jiných populací, jako jsou Asiaté, u kterých je virová hepatitida častější (17%) u pacientů s HF.5 v jiných studiích se virová prevalence viru hepatitidy C pohybovala od 3 do 42,7%.1-3

    pacienti s anamnézou chronické konzumace alkoholu nebo rysy RS často přítomné s hyperferritinemií.6 Těžké pití (> 60 g/den alkoholu) byla zjištěna jako příčina,8,13 v 18% populace studován (25.6% pokud vzhledem k tomu, cut-off > 40 g/den). Nadváha (BMI: 25-29.9) a obezita (BMI > 30) se však objevují jako nejdůležitější příčiny této entity: 89% pacientů mělo v době diagnózy HF nadváhu nebo obezitu. Obézních pacientů prezentovány LIC pomocí MRI 34.68 µmol/g, není odlišné od celé studijní skupiny, a 50% odhalil tuku v jejich jater, steatóza. Dále ultrazvuk jater odhalil známky steatózy s podezřením na nealkoholické tukové onemocnění jater u 52% pacientů. Když jsme studovali přítomnost tuku v játrech pomocí MRI, steatóza byla přítomna u 34,17% ze 79 studovaných pacientů. MS je přítomna u 25% dospělých v západních zemích a HF se vyskytuje pouze u 15% pacientů s RS.26-30 V nedávné studii pro zjištění HH a biochemické železem v primární péči, vyvinutý ve Španělsku, 45% pacientů se zvýšenou hladinou železa opatření (TSI a/nebo SF) byla SLEČNA 31 Zejména v naší studii, 56% pacientů s HF splněna kritéria pro MS. s Ohledem na vysoké procento H63D mutace v populaci, jsme studovali HFE mutace v MS group, k určení, pokud tyto mutace predisponují k PANÍ H63D/H63D mutace v MS případech byla výrazně vyšší než v controls7 -21.56 vs. 7.76%− (p = 0.011) a H63D allelickou frekvence byla 42,15% v MS skupina a 31% u kontrol (p = 0.027). Tyto výsledky poukazují na to, že H63D/H63D genotypů a alely H63D předurčují pacientů s HF rozvíjet PANÍ

    Analýza high SF skupině, jsme našli žádný vztah mezi HFE mutací a SF > 1 000 ng/L 12 pacientů s vysokým SF, LIC byla stanovena pomocí MRI z 10. LIC byla zvýšena u 8 z těchto 10 pacientů (80%), což naznačuje, že měli IO.

    závěr

    Závěrem lze z této studie říci, že genotyp H63D/H63D předurčuje k HF. Obezita a nadváha jsou velmi důležitými etiologickými faktory, které postihují 89% našich pacientů s HF. V našem regionu může být alkohol příčinou HF, ale viry byly jako základní faktor vzácné. Ne všechny HF představují přetížení železa6 ale MRI odhalila přetížení železem u 33% pacientů. RS je přítomna u 56% pacientů a může být indukována genotypem H63D/H63D a alelou H63D.

    zkratky

    • BMI: index tělesné hmotnosti.

    • Fe: železo.

    • HF: hyperferritinémie.

    • HH: dědičná hemochromatóza.

    • Hio: vysoké přetížení železem.

    • IO: přetížení železa.

    • LIC: koncentrace železa v játrech.

    • MRI: zobrazování magnetickou rezonancí.

    • MS: metabolický syndrom.

    • SF: feritin.

    • TSI: saturace transferinu.

    střet zájmů

    autoři nehlásí žádný střet zájmů. Autoři jsou zodpovědní za obsah a psaní příspěvku.

    autorské příspěvky

    všichni autoři splnili kritéria pro autorství stanovená Mezinárodním výborem redaktorů lékařských časopisů. Rukopis představuje poctivou práci a všichni autoři jsou schopni ověřit platnost výsledků.

    Kongres: prezentován jako abstrakt na mezinárodním setkání jater (EASL) 2012; Barcelona, Španělsko, Duben 18-22 / 2012.

    potvrzení

    autoři děkují překladatelskému oddělení Instituto Vasco de Investigaciones Sanitarias (BIOEF) za jejich pomoc.

    Napsat komentář

    Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.